天津酶聯(lián)科興生物長期專業(yè)供應ELISA試劑盒,產(chǎn)品種類齊全,包括人、大小鼠、牛羊馬猴等各種種屬的ELISA試劑盒。本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中待測物質(zhì)水平

　　注:本公司提供試劑盒免費代測服務。需要其他檢測試劑盒請咨詢銷售人員。

　　產(chǎn)品名稱酶聯(lián)科興生物人免疫球蛋白EFc段受體Ⅱ檢測試劑盒

　　產(chǎn)品規(guī)格96T/48T

　　保存2-8°C

　　有效期6個月

　　產(chǎn)品說明書咨詢銷售人員獲取說明書

　　實驗原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中兔層粘連蛋白(LN)水平。用純化的兔層粘連蛋白(LN)捕獲抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被的微孔中依次加入兔層粘連蛋白(LN),再與HRP標記的檢測抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的兔層粘連蛋白(LN)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中兔層粘連蛋白(LN)含量。

　　樣品采集:

　　1.取動物全血按常規(guī)方法制備血清，要求血清清亮，無溶血、無污染。樣品1周內(nèi)可于2～8℃保存，長期需置-20℃保存。

　　2.用樣品稀釋液將待檢血清按40倍稀釋（如5μl血清加入195μl樣品稀釋液中，混勻）。陰、陽性對照不用稀釋。

　　3.濃縮洗滌液使用前應恢復至室溫使沉淀溶解，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。

　　四、兔ELISA試劑盒檢驗方法

　　1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復至室溫。

　　2.取所需用量酶標板條，設空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔，未用的板條盡快密封，2～8℃保存。

　　3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl；陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl；樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。

　　4.混勻，置37℃反應30分鐘。

　　5.扣去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，重復洗滌5次，拍干。

　　6.每孔加酶標記物100μl（空白孔除外）。置37℃反應30分鐘。

　　7.洗滌，同步驟5。

　　8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混勻，37℃避光反應10分鐘。

　　9.每孔加終止液50μl，混勻，用空白孔調(diào)零，于450nm(可用630nm作參比波長）測定各孔吸光值（A值）

　　兔ELISA試劑盒的自備物品:

　　1、37℃恒溫箱

　　2、標準規(guī)格酶標儀

　　3、精密移液器及一次性吸頭

　　4、蒸餾水

　　5、一次性試管

　　6、吸水紙

　　樣本處理及要求:

　　1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。

　　2.血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。

　　3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

　　4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

　　5.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

　　6.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.

　　7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

　　酶聯(lián)科興生物人免疫球蛋白EFc段受體Ⅱ檢測試劑盒相關產(chǎn)品:

　　大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒

　　大鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA試劑盒

　　大鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒

　　大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒

　　大鼠膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒

　　大鼠素原(aGT)ELISA試劑盒

　　大鼠熱蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒

　　大鼠丙二醛(MDA)ELISA試劑盒

　　大鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒

　　大鼠熱蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA試劑盒

　　大鼠血清總補體(CH50)ELISA試劑盒

　　大鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA試劑盒